生长停滞特异性蛋白6对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护研究题录附视频

目的研究生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对脓毒症急性肺损伤小鼠的保护作用, 并探讨其作用机制。方法取90只BALB/c雄性小鼠, 按随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、脓毒症+生理盐水组、脓毒症+Gas6干预(1 μg)组、脓毒症+Gas6干预(5 μg)组、脓毒症+Gas6干预(10 μg)组, 每组15只。脓毒症和脓毒症+Gas6干预组行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP), Gas6干预组术后立即尾静脉注射Gas6。假手术组仅行开腹, 不予以结扎穿孔。术后24 h收集血液, 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平;处死小鼠, 留取肺组织, 测定肺组织湿/干质量比值(W/D);观察肺组织病理学改变, 计算肺组织病理评分;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测肺组织胞核NF-κB p65及胞浆IκB-α蛋白表达。统计学方法采用SPSS 23.0统计软件, 两组样本比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析检验。结果与假手术组相比较, 脓毒症组小鼠血清TNF-α(P=0.000)、IL-1β(P=0.000)、肺组织湿/干重比值(W/D)(P=0.000)、肺组织病理评分(P=0.000)、肺组织胞核NF-κB p65蛋白含量(P=0.006)的表达均增加, 而肺组织胞浆IκB-α(P=0.001)表达明显下降。与脓毒症+生理盐水组相比, 脓毒症+Gas6(1、5、10 μg)组小鼠24 h后血清中TNF-α(P=0.000)、IL-1β(P=0.000)、肺W/D(P=0.000)、肺组织病理评分(P=0.000)、肺组织胞核NF-κB p65蛋白含量(P=0.000)的表达水平降低, 而胞浆IκB-α(P=0.009)表达水平明显上升并呈一定的剂量依赖关系。结论 Gas6能够有效减轻脓毒症所致的肺损伤, 其分子作用机制可能与抑制炎性反应以及下调NF-κB p65胞核内转位有关。