人胎肝干细胞在重症联合免疫缺陷小鼠损伤肝脏中的植入

目的:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离培养肝干细胞,并观察其在重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠损伤肝脏中的植入。方法:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离干细胞并进行体外长期培养, 用RT PCR方法检测肝干细胞相关分子标志以及八聚物结合蛋白4(Oct 4)的表达,然后植入经四氯化碳(CCl4)造成急性肝损伤的SCID小鼠体内,在移植后2、10、17 d分别对受体鼠肝脏冰冻切片进行荧光观察和H E染色。结果:所建立的胎肝细胞系不仅表达二肽水解酶Ⅳ(DPPⅣ)、白蛋白(Alb)、细胞角蛋白(CK)19、γ谷氨酰转肽酶(γGT)、CK18、肝细胞生长因子受体(c met)、干细胞因子受体(c kit)等肝干细胞相关标志,还表达干细胞转录因子Oct 4。在细胞移植后2 d,肝脏冰冻切片未见绿色荧光;移植后10 d和17 d肝脏冰冻切片见散在的绿色荧光。对同一切片做H E染色,发现绿色荧光部位为肝板内的多个成熟肝细胞。结论:从人胚胎肝脏中分离的干细胞能够植入SCID小鼠的损伤肝脏。