利用抑制性减数杂交技术(SSH)研究IL-10抑制表达的新基因附视频

被引：22

作者：

韩文玲

李莹

张颖妹

徐秀珍

宋泉声

狄春辉

马大龙

机构：

[1] 北京医科大学卫生部医学免疫学重点实验室

[2] 北京医科大学卫生部医

来源：

中华微生物学和免疫学杂志 | 2000年 / 02期

关键词：

白细胞介素10; U937细胞; 抑制性减数杂交;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100108 [医学免疫学];

摘要：

目的　利用抑制性减数杂交 (SSH)技术筛选IL 10抑制表达的新基因。方法　以PHA刺激的U937细胞为tester,以PHA刺激同时IL 10抑制的U937细胞为driver,提取mRNA ,反转录构建cDNA文库 ,利用SSH技术筛选IL 10抑制表达的新基因。结果　通过SSH技术 ,发现了 15个可能的IL 10抑制表达的基因 ,其中 6个与GenBank中已公布的表达序列检签 (expressedsequencetag ,EST)片段没有明显同源性 ,为新基因 ,其中之一经EST拼接 ,得到全长cDNA ,为一种新的C C家族趋化因子 ,已被GenBank收录 ,收录号码为AF0 96 985。挑选 4个新基因进行Northernblot分析 ,发现IL 10可抑制其中 3个新基因表达。结论　SSH技术是一种高效的差异基因筛选方法 ,IL 10可抑制多种包括新细胞因子基因的表达

引用

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