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菠菜二磷酸核酮糖(RuBP)羧化酶简化提纯研究
被引：19
作者：
王维光
李立人
机构：
[1] 中国科学院上海植物生理研究所光合室,中国科学院上海植物生理研究所光合室
来源：
关键词：
克分子浓度;
不同温度;
摩尔浓度;
蛋白;
菠菜叶;
RuBP;
柱层析;
上清液;
二磷酸;
焦磷酸;
缓冲液;
粗提液;
磷酸甘油酸激酶;
丙酮酸激酶;
柱体积;
醛脱氢酶;
光密度;
摄影密度;
电泳槽;
三氯乙酸;
羧化酶;
D O I：
暂无
中图分类号：
学科分类号：
摘要：
菠菜叶粗提液在50～70℃下进行不同温度保温试验,观察到菠菜RuBP羧化酶在60℃以下都是稳定的,而其他不少蛋白在50℃热处理时就急剧变性沉淀。在不同pH条件下60℃加热10分钟,RuBP羧化酶在pH6.8～9均影响不大,低于pH6.8其他蛋白绝大部分变性沉淀,在pH6.8以上,其他蛋白的残存含量随pH升高而增加。故分离提纯RuBP羧化酶时,选定菠菜叶匀浆热处理的最适条件:pH为6.8,温度为60℃保温10分钟。然后于2500g离心10分钟,上清液于35～45％饱和度硫酸铵分部沉淀,再经Sephadex G-50和G-200柱层析可达到纯化。
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页码：257 / 262
页数：6
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