H5N1虎源流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及临床应用

被引：6

作者：

侯小强 ^{[1
]}

夏咸柱 ^{[2
]}

高玉伟 ^{[1
]}

薛琳 ^{[1
]}

王铁成 ^{[2
]}

机构：

[1] 吉林大学畜牧兽医学院

[2] 解放军军事医学科学院军事兽医研究所

来源：

畜牧与兽医 | 2006年 / 09期

关键词：

H5N1虎源流感病毒; 荧光定量RT-PCR; 检测方法;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

根据本室分离获得的虎源H5N1流感病毒的HA基因序列测定结果,结合GenBank中报道的H5亚型禽流感病毒HA基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列区作为扩增区域,利用Primer5·0引物设计软件和BLAST软件程序设计出特异性扩增引物。采用成本较低、不需要特异探针引物、优化周期短,能区分病毒变异株的SYBRGreenI随机掺入法建立定量PCR反应体系,并对反应条件进行优化。试验结果表明应用该方法对虎源H5流感病毒的检测具有高度的特异性,检测的灵敏度为101～102拷贝数。对20份病死老虎临床病料和24份人工感染的小鼠脏器病料用荧光定量RT-PCR方法、常规RT-PCR方法和病毒分离方法进行检测,荧光定量RT-PCR方法检测结果略高于常规RT-PCR方法,但与病毒分离方法结果相一致。这说明荧光定量RT-PCR方法可以对临床上H5N1虎源流感病毒检测提供参考。

引用

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页数：4

共 2 条

[1] 荧光定量RT-PCR在流感病毒检测上的应用 [J].

程小雯 ;

周丽 ;

赵锦 ;

房师松 ;

庾蕾 ;

叶宝英 ;

何建凡 ;

吕星 ;

张再清 ;

杨洪 .

中华实验和临床病毒学杂志, 2004, (03) :90-91

[2] 通过病毒分离鉴定和基因检测首次发现虎流感 [J].

夏咸柱 ;

高玉伟 ;

扈荣良 ;

王立刚 ;

刘丹 ;

邹啸环 ;

黄耕 ;

贺文琦 ;

王玮 ;

苏伟林 ;

刘文良 .

中国兽医学报, 2003, (02) :107-110

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