人脐静脉内皮细胞的继代培养

目的：研究人血管内皮细胞在体外长期传代培养的方法。方法：采用０．１２５％胰酶ＥＤＴＡ液灌注冲洗法，从人脐静脉中分离出血管内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）；用０．０２％ＥＤＴＡ消化传代ＥＣ，用新生小牛视网膜提取物（ＲＤＳ）作为生长促进剂。应用光镜、电镜、免疫组化等方法对原代和继代内皮细胞进行鉴定和生长特性观察。结果：人脐静脉内皮细胞继代培养３６代。原代和继代内皮细胞胞浆中含有Ｗ Ｐ小体和Ⅷ因子相关抗原；传代ＥＣ保留原代ＥＣ的生物学特征。５０％血清明胶和大白鼠尾胶原预先覆膜培养板，提高ＥＣ贴壁率。结论：传代ＥＣ培养能代替原代ＥＣ培养作为体外研究模型。ＲＤＳ能维持ＥＣ长期传代培养。