猪瘟病毒石门强毒株和兔化弱毒疫苗株E2蛋白糖基化位点差异分析

被引:18
作者
彭伍平
夏照和
侯强
李娜
孙元
童光志
仇华吉
机构
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室
关键词
猪瘟病毒; E2囊膜糖蛋白; 糖基化位点; 杆状病毒表达系统; 蜂素信号肽;
D O I
10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001835
中图分类号
S852.5 [血清学];
学科分类号
090601 ;
摘要
猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株E2糖蛋白分别含有5个和6个潜在的糖基化位点,其中986N是兔化弱毒疫苗株所特有的。为了分析二者糖基化位点差异及其影响,将去掉信号肽和跨膜区的猪瘟病毒石门强毒株(Shi-men)和兔化弱毒疫苗株(HCLV)E2基因置于蜂素信号肽序列下游,使其在Sf9细胞内表达重组Shimen-E2和HCLV-E2蛋白。结果显示,重组E2蛋白以二聚体的形式分泌表达于细胞培养液中,但二者分子量存在差异。用endo H和PNGase F对纯化后的重组E2蛋白进行去糖基化处理后,二者分子量大小变成一致,证实石门强毒株和兔化弱毒株E2蛋白分子量大小的差异可能是由于糖基化程度的差异所致。对986N糖基化位点进行定点突变后发现,突变后的Shimen-E2与野生型HCLV-E2分子量大小一致,而突变后的HCLV-E2与野生型Shimen-E2分子量大小一致,表明Shimen-E2和HCLV-E2分子量大小的差异的确是由于986N糖基化位点的差异引起的。
引用
收藏
页码:389 / 393
页数:5
相关论文
共 7 条
[1]  
猪瘟兔化弱毒疫苗株cDNA分子克隆与嵌合分子克隆的构建.[D].王明杰.新疆农业大学.2006, 02
[2]  
猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的表达及其单克隆抗体的制备.[D].侯强.中国农业科学院.2006, 10
[3]  
Glycosylation of hepatitis C virus envelope proteins.[J].Anne Goffard;Jean Dubuisson.Biochimie.2003, 3
[4]  
Expression of recombinant proteinase 3; the autoantigen in Wegener's granulomatosis; in insect cells.[J].Y.M. Van der Geld;M.L.F. Smook;M.G. Huitema;M.C. Harmsen;P.C. Limburg;C.G.M. Kallenberg.Journal of Immunological Methods.2002, 1
[5]   A bifunctional fusion protein containing the maltose-binding polypeptide and the catalytic chain of aspartate transcarbamoylase: Assembly, oligomers, and domains [J].
Yang, YR ;
Schachman, HK .
BIOPHYSICAL CHEMISTRY, 1996, 59 (03) :289-297
[6]   猪瘟病毒石门株基因组全长cDNA的克隆与序列分析 [J].
李国新 ;
李娜 ;
仇华吉 ;
朱庆虎 ;
李艳 ;
王明杰 ;
李继昌 ;
童光志 .
中国预防兽医学报, 2006, (03) :275-278
[7]   糖基化与病毒 [J].
潘浩 ;
周迎会 ;
吴士良 .
生命的化学, 2005, (01) :26-29