反相液相色谱中温度对蛋白分子构象变化的新表征

液相色谱中溶质计量置换保留模型的Ｚ值可用来对反相高效液相色谱中热变蛋白的分子构象进行表征。发现在异丙醇－甲酸４４％（Ｖ／Ｖ）－水体系为流动相时完全变性蛋白的Ｚ值随温度升高而降低，且Ｚ值与绝对温度倒数（１／Ｔ）成正比，因此蛋白分子构象变化可用Ｚ对１／Ｔ作图所得两条直线的斜率差值来表征，差值愈大，蛋白分子构象变化愈甚。该两直线的交点即为蛋白分子构象的突变温度。与通常采用的１ｇｋ＇对１／Ｔ的作图相比，用Ｚ对１／Ｔ作图对蛋白分子构象进行表征不仅对各种热变蛋白都有效，而且结果准确。