粒细胞集落刺激因子和AMD3100增加白血病细胞对化疗敏感性的机制研究

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)和AMD3100增加白血病细胞对化疗敏感性的作用及其机制。方法:用G-CSF、AMD3100单药或联合处理HL-60细胞株后,与HS-5上清或HS-5细胞共培养,采用CCK-8法检测细胞活力,用AnnexinⅤ试剂盒检测细胞凋亡,流式细胞术和蛋白印迹法分别检测膜表面CXCR4蛋白、总CXCR4蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测mRNA表达情况。结果:HS-5上清或细胞能够保护HL-60细胞免于自发或药物诱导的凋亡,而G-CSF和AMD3100均能够部分逆转这种保护作用,两药联合时更明显;G-CSF能够降低细胞膜表面和细胞质内总CXCR4蛋白及CXCR4 mRNA的表达,同时上调micro RNA-146a(miR-146a)表达;AMD3100只能降低膜表面CXCR4表达,对细胞质内总CXCR4蛋白、CXCR4 mRNA和miR-146a表达无影响。结论:G-CSF和AMD3100通过不同机制降低白血病细胞的CXCR4表达而阻断CXCR4/CXCL12信号轴,从而打破骨髓微环境-白血病细胞间的相互作用,直接增强化疗药物杀伤作用。