白芷介导NF-κB-i NOS靶标镇痛作用成分的筛选及同时测定

目的研究白芷介导NF-κB-iNOS靶标镇痛作用的主要活性成分并建立同时测定方法。方法使用RAW264.7细胞,通过荧光标记法评价白芷中主要化学成分（如欧前胡素、异欧前胡素、补骨脂素、白当归素等）干预下NF-κB表达的影响,初步筛选影响显著的成分;之后同法测定i NOS mRNA表达,根据蛋白表达结果选择镇痛活性成分作为质量评价指标;采用高效液相色谱（HPLC）法测定上述活性成分的含量,采用Waters Xbridge C18色谱柱,水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,进样量10μL,柱温25℃,检测波长214 nm;共测定10批药材提取液。结果 NF-κB-iNOS靶标表达结果显示,欧前胡素和补骨脂素具有较好的镇痛功效,且具有剂量依赖性;含量测定结果显示,10批白芷药材的乙醇提取液中,二组分的含量在0.938～1.146 mg·g-1和1.270～1.481 mg·g-1之间,符合发挥量效关系所需。结论白芷中介导NF-κB-iNOS靶标起镇痛作用的主要活性成分为欧前胡素和补骨脂素,上述成分在药材中含量适宜,可以作为研究白芷镇痛功效机制的物质基础和质量评价指标。