桉树的ISSR反应体系建立及优化

被引：7

作者：

覃子海

黄金使

刘海龙

吴幼媚

机构：

[1] 广西林业科学研究院

来源：

广西林业科学 | 2007年 / 04期

关键词：

桉树; ISSR; 反应条件; 优化;

D O I：

10.19692/j.cnki.gfs.2007.04.005

中图分类号：

S792.39 [桉];

学科分类号：

0829 ; 0907 ;

摘要：

以改进的CTAB法提取桉树嫩叶总DNA,进行ISSR分析,分别测试了退火温度、模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响。桉树ISSR-PCR分析较适宜的扩增条件是:25μL PCR反应体积中,buffer（10 mM Tris-HCl,pH9.0,50 mM KCl,0.1%Triton X-100）,1.25 U TaqDNA聚合酶,4种dNTPs各0.2 mM,0.4μM引物,2.0mM MgCl2,50 ng模板DNA。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min,然后进行45个循环:94℃变性45s,52℃55℃复性45s,72℃延伸90s,循环结束后72℃延伸7min。

引用

页码：196 / 198+205 +205

页数：4

共 4 条

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