水稻cDNAc73片段在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化

被引：6

作者：

唐威华

仇子龙

王宗阳

张景六

洪孟民

机构：

[1] 中国科学院上海植物生理研究所!上海,中国科学院上海植物生理研究所!上海,中国科学院上海植物生理研究所!上海,中国科学院上海植物生理研究所!上海,中国科学院上海植物生理研究所!上海

来源：

植物生理学报 | 1999年 / 04期

关键词：

水稻; 转录因子; DNA结合蛋白; His6融合表达; NiNTA树脂亲和层析;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

曾以水稻蜡质基因５’调控区内一段３１ｂｐ片段为探针，用酵母单杂交法从水稻ｃＤＮＡ文库中筛选出若干个其编码的蛋白可能与此３１ｂｐ片段结合的ｃＤＮＡ克隆，现将其中的ｐＣ７３克隆中的插入片段ｃ７３连接到含Ｈｉｓ６的表达载体ｐＥＴ２８ｃ（＋）上，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中进行诱导表达，并用ＮｉＮＴＡ树脂纯化得到预期的融合表达产物。在合适的诱导表达条件下，融合表达产物主要以可溶形式存在于大肠杆菌细胞内；表达量占到大肠杆菌总蛋白的１０％左右；经ＮｉＮＴＡ树脂亲和层析纯化得到的产物纯度达９５％，可供进一步研究之用。

引用

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