人核迁移蛋白单克隆抗体的制备及其在人巨核细胞中的表达

被引：1

作者：

陈彦球 ^{[1
]}

葛怡琛 ^{[2
]}

杨燕 ^{[3
]}

机构：

[1] 中山大学第一附属医院

[2] 广东省职业病防治院毒理科

[3] 中山大学公共卫生学院

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2008年 / 09期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

人核迁移蛋白; 单克隆抗体; 巨核细胞;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.004817

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的:制备人核迁移蛋白(hNudC)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:从人胎肝组织中克隆得到hNudC基因,构建重组表达质粒pET-28b/hNudC,表达带有6-His标记的重组hNudC,用纯化的重组hNudC蛋白免疫BALB/c小鼠制备mAb,用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆,用免疫荧光染色法及Western blot试验鉴定mAb的特异性。结果:获得2株杂交瘤细胞系2C16和2D8,其分泌的mAb的Ig亚类(型)分别为IgG1和IgM(κ),杂交瘤细胞培养上清的ELISA效价分别为1∶64和1∶32;腹水mAb的效价分别为1∶1×105和1∶5×104。mAb与重组hNudC蛋白有较强的特异性反应,免疫荧光染色和Western blot试验证明,制备的mAb可以识别人巨核系白血病细胞株Dami、Meg-01和人脐带血来源的CD41+巨核细胞中表达的hNudC蛋白。结论:成功地制备了特异性抗hNudC mAb,为研究hNudC蛋白的功能、天然分布及异常表达奠定了基础。

引用

页码：894 / 897

页数：4

共 3 条

[1]

The human homologue of the Aspergillus nuclear migration gene nudC is preferentially expressed in dividing cells and ciliated epithelia[J] . Christopher D. Gocke,Stephen A. Osmani,Barbara A. Miller.Histochemistry and Cell Biology . 2000 (4)

[2]

The Nuclear Migration Gene Nudc and Human Hematopoiesis[J] . Christopher D. Gocke,Gregory H. Reaman,Carol Stine,Min-Ying Zhang,Stephen A. Osmani,Barbara A. Miller.Leukemia ＆ Lymphoma . 2000 (5-6)

[3] Molecular cloning and characterization of the human NUDC gene [J].

Matsumoto, N ;

Ledbetter, DH .

HUMAN GENETICS, 1999, 104 (06) :498-504

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