补阳还五汤类方提取物对PC12细胞氧化应激损伤模型凋亡与自噬的调控

被引:17
作者
刘芳 [1 ,2 ]
朱炎贞 [3 ]
赵冯岩 [1 ]
胡耀梅 [1 ]
黄晓洁 [1 ]
范若颖 [1 ]
余东霖 [1 ]
陈乃宏 [1 ,2 ,4 ]
机构
[1] 湖南中医药大学药学院
[2] 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心
[3] 湖南中医药大学中西结合学院
[4] 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所
基金
湖南省自然科学基金;
关键词
补阳还五汤类方提取物; 氧化应激损伤; 凋亡; 自噬; Bcl-2; Bax; Beclin1; LC3A; LC3B;
D O I
暂无
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的从凋亡与自噬的调控探讨补阳还五汤类方提取物对PC12细胞氧化应激模型的保护机制。方法以不同浓度H2O2刺激PC12细胞制备不同损伤程度的氧化应激模型,采用MTT法确定补阳还五汤类方提取物对氧化应激损伤初期和加剧期发挥保护作用的有效浓度,流式细胞术和TUNNEL法检测细胞凋亡情况,透射电镜和m RFP-GFP-LC3腺病毒双标法检测细胞自噬情况,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)与自噬相关蛋白(Beclin1、LC3A和LC3B)的表达。结果分别以0.5、2.0 mmol/L H2O2处理PC12细胞制备氧化应激损伤的初期模型和加剧期模型;与对照组比较,模型组细胞凋亡率增加,自噬程度加剧,Bax/Bcl-2比例增加,Beclin1和LC3B表达上调,LC3A表达下调(P<0.05);与氧化应激损伤初期的模型1组比较,补阳还五汤类方提取物均能下调Bax/Bcl-2,抑制凋亡率,并一定程度上调Beclin1和LC3B/LC3A的表达,激活自噬(P<0.05);当氧化应激损伤程度加剧时,模型细胞中出现较高水平的凋亡与自噬,此时,两方则通过抑制凋亡和降低自噬,共同发挥保护作用。结论补阳还五汤类方提取物可通过对凋亡与自噬的交互动态调控对不同程度损伤的氧化应激模型细胞挥发保护作用。
引用
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页数:9
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