HBx及其羧基末端40个氨基酸对SMMC-7721肝细胞增殖的影响

目的研究HBx羧基末端40个氨基酸对肝癌细胞增殖的影响及作用机制。方法用HBx及去除羧基末端40个氨基酸HBx3′40转染含野生型(wt)p53的SMMC7721细胞,经稳定筛选后,通过细胞生长曲线绘制以及平板克隆形成实验来观察HBx对细胞增殖的影响,并通过裸鼠体内的成瘤实验观察各移植瘤的大小及重量、增殖细胞核抗原(PCNA)表达的变化。结果细胞生长曲线表明HBx及HBx3′40的细胞生长速度明显较空载体增快;平板克隆形成试验表明克隆形成率,HBx组(48.7±8.1)%及HBx3′40组(82.8±6.0)%较对照组(26.9±3.5)%明显增多(P<0.05),pcDNA3HBx3′40组又较pcDNA3HBx组增多(P<0.05)。裸鼠成瘤实验pcDNA3HBx3′40组肿瘤的大小及重量(1.476±0.232、0.987±0.279)%及pcDNA3HBx组(0.412±0.212、0.395±0.159)%较对照组(0.051±0.024、0.033±0.004)%明显增大(P<0.05),肿瘤细胞的PCNA表达率pcDNA3HBx3′40组(69.25±3.77)%及pcDNA3HBx组(59.00±2.58)%也较对照组(37.67±2.52)%明显增强(P<0.05),且以HBx3′40组的表现更为明显(P<0.05)。结论HBx的羧基末端40个氨基酸可刺激细胞增殖,其突变可能与肝癌细胞发生过程中促进癌细胞的恶性转化有关。