透骨消痛胶囊对膝骨关节炎大鼠内质网应激影响的研究

目的:观察透骨消痛胶囊对膝骨关节炎大鼠软骨内质网应激的影响,探讨透骨消痛胶囊治疗骨关节炎的可能机制。方法:将30只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,透骨消痛胶囊高、中、低剂量组,每组6只。除正常对照组外,其余各组采用质量分数为4%的木瓜蛋白酶注射建立大鼠膝骨关节炎模型。给药8周后,收集大鼠右侧股骨髁和胫骨平台,光镜检查软骨组织的形态学变化,利用原位末端标记法(Td T-mediated d UTP nick-end labeling,TUNEL)检测软骨细胞凋亡情况,免疫组化检测软骨组织内质网应激蛋白激酶(PKR-like ER kinase,PERK)、真核启动因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,e IF2α)、转录活化因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、免疫球蛋白结合蛋白(immunoglobulin binding protein,Bip)、生长抑制DNA损伤基因153(growth arrest and DNA-damage-inducible gene 153,GADD153)、软骨细胞功能基因Ⅱ型胶原蛋白(CollageⅡ)和转录因子SOX-9蛋白的表达。结果:透骨消痛胶囊对大鼠骨关节炎模型关节软骨的大体外观及HE染色均有明显改善,TUNEL结果显示其能够降低软骨细胞凋亡指数(P<0.01),免疫组化结果显示透骨消痛胶囊较模型对照组能够下调PERK、e IF2α、ATF4、Bip及GADD153蛋白表达,上调软骨细胞功能基因CollageⅡ和SOX-9的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:透骨消痛胶囊可通过抑制内质网应激的信号转导,减少软骨细胞的凋亡数目,改善软骨细胞形态,促进软骨细胞代谢及软骨修复,以维持软骨结构的相对完整,从而延缓关节软骨退变。