罗汉果ISSR-PCR反应体系的建立

被引：25

作者：

周俊亚

宾晓芸

彭云滔

唐绍清

机构：

[1] 广西师范大学生命科学学院

[2] 广西师范大学生命科学学院广西桂林

[3] 广西桂林

来源：

广西师范大学学报(自然科学版) | 2004年 / 03期

关键词：

生物化学; 罗汉果; ISSR; 反应体系; 遗传多样性;

D O I：

10.16088/j.issn.1001-6600.2004.03.018

中图分类号：

S668.9 [其他];

学科分类号：

090201 ;

摘要：

以罗汉果 ( Siraitia grosvenorii) DNA为材料 ,分析了模板 DNA,Mg2 + ,d NTPs,引物的浓度 ,Taq DNA聚合酶的用量以及循环次数对 ISSR-PCR扩增结果的影响 ,确立了稳定的、可重复的罗汉果 ISSR最佳反应体系和 PCR扩增参数 :在 2 5μL的 PCR反应体系中 ,含 2 0～ 5 0 ng模板 DNA,1 U Taq酶 ,1× PCR缓冲液 ,2 .0 mmol/L Mg Cl2 ,4种 d NTPs各 2 0 0 μmol/L,0 .5 μmol/L引物 ;PCR扩增程序为 94°C预变性 3 min,接着进行 40个循环 :94°C变性 1 min,5 2°C退火 5 0 s,72°C延伸 2 min,循环结束后 72°C延伸 7min.

引用

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页数：4

共 13 条

[1]

油茶遗传多样性及遗传性状的RAPD分析.[D].张云.福建师范大学.2003, 01

[2]

特有濒危植物八角莲遗传多样性研究.[D].李忠超.浙江大学.2002, 02

[3] Evaluation of inter-simple sequence repeat analysis for mapping in Citrus and extension of the genetic linkage map [J].