微小RNA-21靶向调控肿瘤易感性候选基因2在肾癌细胞中的表达和作用

目的观察调控肿瘤易感性候选基因2 (CASC2)在肾癌细胞中的表达和作用,微小RNA-21(miR-21)能否调控CASC2表达和作用。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测肾癌细胞株(786-0和A498)和人胚胎肾细胞株(HEK 293)的CASC2表达,构建高表达质粒PcDNA3.1(+)-CASC2并转染上调CASC2表达,通过噻唑蓝(MTT)比色分析法和细胞划痕实验观察786-0和A498细胞株的增殖、迁移是否受影响;构建野生型CASC2质粒(CASC2-WT)和突变体CASC2质粒(CASC2-MUT),分别与miR-21 mimic共转染,通过双荧光素酶报告分析确认miR-21对CASC2直接靶向作用,并用qPCR法检测CASC2表达变化;通过MTT和细胞划痕实验观察共转染对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响。结果 786-0和A498细胞株的CASC2表达水平明显低于HEK 293细胞(P=0.017、0.033);pcDNA3.1(+)-CASC2过表达质粒转染后,786-0和A498细胞的增殖和迁移能力明显受到抑制(P=0.001、0.008、0.007、0.009);miR-21高表达可直接靶向作用于CASC2,降低786-0和A498细胞株的CASC2表达水平下降(P=0.000、0.005),CASC2对786-O和A498细胞株的增殖与迁移的抑制作用也被部分消除(P=0.017、0.011、0.042、0.025)。结论 CASC2在肾癌细胞中表达明显降低,起到肿瘤抑制基因的作用,miR-21直接靶向作用CASC2并抑制其表达,从而部分消除CASC2对肿瘤细胞的抑制作用。