PCR方法用于我国A组轮状病毒的分型研究

Ａ组轮病毒（ＲＶ）是婴幼儿秋冬季病毒性腹泻的最主要病原。当ＲＶ感染时，组成病毒外壳的两个蛋白ＶＰ７和ＶＰ４都能刺激机体产生中和抗体。本文采用套式ＰＣＲ方法对我国河北、河南１９８９－１９９０年１４１份ＲＶ阳性便样进行了分型研究。便样悬液中的病毒经硫氰酸胍裂解，玻璃珠吸附、洗脱，提取ＲＮＡ。分别选择编码ＶＰ７和ＶＰ４基因的高保守序列设计引物，先经逆转录ｃＤＮＡＰＣＲ一次放大后，再分别选择基因内不同血清型的特征序列设计一组分型引物，与另一端的保守序列引物配对，经ＰＣＲ二次放大，从放大产物的特征分子量大小，区别ＲＶ样品的不同血清型。结果表明，河北、河南两省流行的ＲＶ以（Ｇ１、Ｐ１）型为主，其次为（Ｇ２、Ｐ２）型，个别为（Ｃ３、Ｐ１）型和（Ｇ４、Ｐ１）型，未发现其它Ｐ型毒株。Ｇ型ＰＣＲ分型与ＭｃＡｂＥＬＡ分型结果比较，符合率为９７．７％。毒株Ｇ型和Ｐ型的关系与文献报道的一些规律相比，符合率为９７．１％。个别毒株型别特殊，与ＲＮＡＰＡＧＥ结果亦不能对应，有待进一步研究。本实验结果对研制轮状病毒疫苗有重要的指导意义。