人α1型基因工程干扰素的中间试制

被引:4
作者
童葵塘
徐伦
黄培仁
张玫萍
沈幼美
屠宗青
陈志佳
侯云德
机构
[1] 卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所,卫生部上海生物制品研究所上海,上海,上海,上海,上海,上海,上海,上海
关键词
a1型干扰素; 基因工程;
D O I
10.13200/j.cjb.1990.03.23.tongkt.005
中图分类号
学科分类号
摘要
带有杂交质粒pBV867的大肠杆菌BMH 71-18株,用高密度发酵培养法进行发酵,3批中试的平均菌产量为100.25克/升,粗制干扰素的表达量平均为8.39mg/升。3批粗制干扰素的数量分别为35000,30000和36000 ml。经初步提纯,分别浓缩10.4、10和11.29倍,比活性上升10、33和30倍,初步提纯的得率为34.33%。经高度提纯、浓缩23.8、16.7和26.1倍,比活明显增加至24.38、20.80和21.43×10~6 IU/mg蛋白,平均得率为35.92%,总得率为11.82%,平均提纯倍数为1757倍。 3批中试产品按WHO规程的标准进行检定,经SDS-PAGE银染色法测定,呈一条带,其分子量约为21000,无论在还原或非还原的条件下干扰素纯度均在95%以上。用HPLC检定均为单一峰形,纯度在95%以上。其它检定项目如等电聚焦、效价、热原、残余DNA、鼠IgG含量测定和全波长扫描等均合乎规程要求。
引用
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中国医学科学院学报, 1982, (06) :327-335