镉离子多克隆抗体ELISA竞争法的初步建立

被引:35
作者
王建华
唐勇
向军俭
王宏
杨红宇
凌钦婕
机构
[1] 暨南大学抗体工程研究中心
基金
广东省科技计划;
关键词
镉离子; 重金属; 竞争ELISA; 多克隆抗体;
D O I
10.13200/j.cjb.2008.01.61.wangjh.014
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
目的制备抗镉离子螯合物的多克隆抗体,初步建立检测镉离子的ELISA竞争法。方法用双功能螯合剂iEDTA螯合Cd2+后,再与匙血蓝蛋白(KLH)偶联,合成完全抗原(Cd-iEDTA-KLH),免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体。ELISA法检测其抗血清效价、特异性和灵敏度。结果多克隆抗体效价均大于1∶80000;特异性检测结果显示均产生了抗Cd-iEDTA抗体,与OVA、BSA无交叉反应。抗体除与Hg2+有较强的交叉反应外,同等抑制情况下,Mg2+、Ca2+、Fe3+、Cu2+、Ni2+、Zn2+与Cd2+浓度相差约1000倍,交叉反应率很低;ELISA竞争法对镉离子的检测限约为50ng/ml。结论初步建立了镉离子的ELISA竞争法,检测限达到无公害的国家卫生限量标准(100ng/g)。
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