金丝桃苷增强共刺激细胞杀伤胃癌细胞MKN-45的研究

被引：3

作者：

代培培 ^{[1
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陈剑群 ^{[1
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刘军权 ^{[2
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陈复兴 ^{[2
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李莹 ^{[2
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吕小婷 ^{[2
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李昳 ^{[2
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周忠海 ^{[2
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机构：

[1] 徐州医学院附属医院消化内科

[2] 解放军第九七医院生物治疗中心

来源：

国际免疫学杂志 | 2014年 / 37卷 / 03期

关键词：

金丝桃苷; 共刺激细胞; 胃癌细胞MKN-45; 杀伤活性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.2 [胃肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的探讨金丝桃苷对共刺激细胞杀伤胃癌细胞MKN-45的影响及可能机制。方法健康者外周血单个核细胞(PBMC)在体外诱导为共刺激细胞,常规传代培养胃癌细胞MKN-45。给予不同浓度金丝桃苷诱导24 h、48 h、72 h,CCK8法和MTT法分别检测人共刺激细胞和胃癌细胞MKN-45增殖情况;诱导72 h,乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定共刺激细胞杀伤胃癌细胞株MKN-45的活性;流式细胞术(FCM)检测共刺激细胞穿孔素、颗粒酶B(GraB)、CD107a、IFN-γ的表达变化;Western blot检测共刺激细胞信号调节蛋白(Bcl-2、p-AKT、p-ERK 1/2、β-catenin)的表达变化。结果培养10天共刺激细胞表达率达到38.85%;低浓度金丝桃苷促进共刺激细胞生长并呈时间依赖性,其中金丝桃苷浓度为0.8μg/mL诱导72 h增殖率达到(43.73±2.99)%,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);浓度>25μg/mL对MKN-45有剂量依赖性抑制作用,抑制率高达57.3%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);金丝桃苷诱导72 h,浓度在0.8μg/mL时对MKN-45的杀伤活性增强作用最大,杀伤活性为(48.13±2.02)%,共刺激细胞穿孔素、GraB、CD107a和IFN--γ的表达明显增加,表达率分别为(85.74±2.89)%、(87.56±3.23)%、(89.66±2.42)%和(82.29±3.95)%,信号调节蛋白Bcl-2、p-AKT、p-ERK1/2、β-catenin的表达也不同程度的增加,灰度值计算表达率分别为(71.86±1.16)%、(14.62±0.84)%、(17.44±1.51)%、(15.12±1.55)%,与对照组比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论金丝桃苷在一定浓度范围内能促进共刺激细胞增殖、抑制胃癌细胞MKN-45的生长,并增强共刺激细胞对胃癌细胞MKN-45的杀伤活性,其机制可能与活化Bcl-2、p-AKT、p-ERK1/2、β-catenin,上调共刺激细胞穿孔素、GraB、CD107a、IFN-γ的表达有关。

引用