HBx基因的克隆和序列分析及其真核表达载体的构建

被引：1

作者：

匡志鹏 ^{[1
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谢裕安 ^{[1
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梁安民 ^{[1
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苏建家 ^{[1
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张瑞萍 ^{[2
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宋水川 ^{[2
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王皓 ^{[2
]}

机构：

[1] 广西医科大学附属肿瘤医院

[2] 第二军医大学国际合作肿瘤研究所

来源：

广西医科大学学报 | 2005年 / 06期

关键词：

肝癌; HBx基因; 真核表达载体;

D O I：

10.16190/j.cnki.45-1211/r.2005.06.009

中图分类号：

R735.7 [肝肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:通过HBx基因的克隆、序列对比和进化树分析以及pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,为进一步研究HBx基因与肝癌发生发展的关系打下基础。方法:用O liga6.0结合P rim er P rem ier 5.0软件设计特异性引物,通过PCR方法从广西HB sA g阳性病人血清中(血清型A drq+)分离得到的病毒株构建的HBxA g质粒中扩增HBx基因。用DNA star5.01和V ector NT I Su ite 8.0软件进行序列对比分析和进化树构建。经双酶切将HBx基因定向插入到pcDNA 3.1(+)质粒中。结果:成功克隆了基因型C型突变型HBx基因,并构建出真核表达载体pcDNA 3.1(+)-HBx。新基因被G eneB ank接受,在G eneB ank上登录号为AY 839630。序列对比和进化树分析表明,新克隆的基因与野生基因型C型有高度的同源性(97.8%),2.2%的变异。结论:从广西HB sA g阳性病人病毒株(血清型A drq+)中发现了新的基因型C型突变型HBx基因(m u tan t genotype C)。pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,将为进一步研究HBx基因在树实验性肝癌诱发过程中所起的作用打下基础。

引用

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