出血性大肠杆菌O157:H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究

被引：9

作者：

张雪寒

何孔旺

卢维彩

赵攀登

温立斌

李彬

郭容利

王小敏

倪艳秀

周俊明

俞正玉

茅爱华

吕立新

机构：

[1] 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心

来源：

华北农学报 | 2010年 / 25卷 / 04期

关键词：

EHECO157∶H7; 转位紧密素受体; 志贺毒素; 融合基因; 免疫原性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。

引用

页码：180 / 185

页数：6

共 2 条

[1] 出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达
张雪寒
何孔旺
卢维彩
俞正玉
茅爱华
刘亚栋
[J]. 内蒙古农业科技, 2009, (03) : 59 - 61
[2] Preliminary FoodNet Data on the Incidence of Infection with Pathogens Transmitted Commonly Through Food - 10 States, 2007[J] . Vugia,D,Cronquist,A,Hadler,J,Tobin-D’Angelo,M,Blythe,D,Smith,K,Lathrop,S,Morse,D,Cieslak,P,Dunn,J,White,P L,Guzewich,J J,Henao,O L,Hoekstra,R M,Scallan,E,Angulo,F J,Griffin,P M,Tauxe,R V,Behravesh,C Barton.MMWR. Morbidity and Mortality Weekly Report . 2008 (14)

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