肠膜明串珠菌α-葡萄糖苷酶基因克隆表达及酶学性质

被引：3

作者：

李书涛

樊攀

程景伟

杨雪鹏

机构：

[1] 郑州轻工业学院食品与生物工程学院

来源：

生物技术进展 | 2012年 / 2卷 / 02期

关键词：

肠膜明串珠菌; 克隆与表达; α-葡萄糖苷酶;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q93 [微生物学];

学科分类号：

071005 ; 100705 ;

摘要：

肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesentcroides ATCC8293)基因组中存在一个编码糖苷酶家族3保守区段的基因(Leum-0289),根据该基因序列设计引物,经过扩增和重组,成功将该基因插入到表达载体pET28a(+)中,实现了该基因的诱导表达。该基因包含2226个碱基,编码742个氨基酸,编码蛋白质理论预测分子质量为75kDa,表达蛋白经SDS-PADE分析,分子质量与理论值基本一致。纯化后的蛋白经酶活测定,发现该酶只能水解α-对硝基苯酚葡萄糖苷(pNPG)底物,无水解甘露糖、蔗糖、纤维二糖、乳糖和龙胆二糖的活性,遂命名为α-葡萄糖苷酶。进一步酶学性质研究表明该酶的最适反应温度和最适反应pH分别为40℃和pH6.5,Fe2+、Ca2+、Mg2+对重组α-葡萄糖苷酶有明显激活作用,而Cu2+、Zn2+对其有一定的抑制作用。

引用

页码：124 / 129

页数：6

共 13 条

[1] α-葡萄糖苷酶的研究进展 [J].

胡先望 ;

杨震 ;

陈朋 ;

梁宁 ;

严晓娟 .

甘肃科学学报, 2011, 23 (01) :143-148

[2] α-葡萄糖苷酶性质、制备及其应用研究 [J].

陈丽华 ;

潘自红 ;

马威 .

食品研究与开发, 2009, 30 (07) :163-165

[3] 黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 [J].

童星 ;

唐秋嵩 ;

吴玉飞 ;

吴敬 ;

陈坚 .

微生物学报, 2009, 49 (02) :262-268

[4] 黑曲霉CICIM F0410中α-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 [J].

周敏 ;

王正祥 .

生物技术通报, 2009, (01) :130-133+137

[5] 红曲菌产α-葡萄糖苷酶固态发酵条件优化 [J].

陈健旋 ;

谢黎明 .

中国酿造, 2008, (18) :43-46

[6] 超嗜热古菌Thermococcus sp．HJ21产高温α-葡萄糖苷酶条件和酶学性质初步研究 [J].

杨磊 ;

吕明生 ;

王淑军 ;

房耀维 ;

刘姝 ;

李华钟 .

食品与发酵工业, 2008, (07) :1-6

[7] 阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及活性研究 [J].

杨捷琳 ;

孟逊 ;

黄应峰 ;

袁辰刚 ;

朱崇日 .

食品科学 , 2008, (02) :213-217

[8] α-葡萄糖苷酶研究现状及进展 [J].

岳振峰 ;

陈小霞 ;

彭志英 .

食品与发酵工业, 2000, (03) :63-67+98

[9]

一种热球菌产高温α－葡萄糖苷酶及其产酶方法[P]. 王淑军;李华钟;杨磊;吕明生;陈丽;刘姝;房耀维.中国专利:CN101195818A,2008-06-11

[10]

Characterization of thermostable α-glucosidases from newly isolated Geobacillus sp. A333 and thermophilic bacterium A343[J] . Arzu Coleri Cihan,Birgul Ozcan,Cumhur Cokmus. World Journal of Microbiology and Biotechnology . 2009 (12)

← 1 2 →