利用Inverse PCR快速筛选单个T-DNA拷贝转基因水稻植株的方法

被引:5
作者
章冰
黄健秋
卫志明
机构
[1] 中国科学院上海植物生理研究所,中国科学院上海植物生理研究所,中国科学院上海植物生理研究所上海,上海,上海
关键词
Inverse PCR; T-DNA拷贝数; 水稻(Oryza sativa L.); 农杆菌介导转化;
D O I
暂无
中图分类号
S511 [稻];
学科分类号
摘要
为了获得单个T-DNA插入拷贝的植株, 我们建立了一套利用Inverse PCR(IPCR)快速检测转基因水稻中T-DNA拷贝数的方法。用IPCR的方法可以扩增出与已知T-DNA序列相邻的水稻基因组DNA未知序列,由此推测转基因水稻植株中T-DNA的拷贝数。我们共对15个转化株系20棵不同植株的DNA进行了IPCR检测。其中12株表现为T-DNA单拷贝插入,3株为双拷贝插入,1株为三拷贝插入。另外4株未检测到T-DNA插入拷贝。IPCR分析结果经过Southern杂交和测序的验证。
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