香菇SRAP扩增体系的建立与优化

被引:16
作者
付立忠 [1 ]
魏海龙 [1 ]
李海波 [1 ]
吴庆其 [1 ]
吴大丰 [2 ]
吴学谦 [1 ]
机构
[1] 浙江省林业科学研究院生物技术研究所
[2] 丽水市食用菌研究开发中心
关键词
香菇; 分子标记; 扩增体系优化; SRAP;
D O I
10.16488/j.cnki.1005-9873.2006.04.003
中图分类号
S646.12 [];
学科分类号
摘要
为了建立稳定的香菇(Lentinula edodes)SRAP(sequence-related amplified polymorphis m,相关序列扩增多态性)分子标记技术体系,以香菇(Lentinula edodes)为材料,采用SDS-CTAB(sodium dodecyl sulfate-cetylri methylammoniumbromide)法提取菌丝体基因组DNA,用琼脂糖检测扩增产物,筛选优化了SRAP扩增条件。可用于香菇SRAP分析的最佳PCR条件为20μL PCR反应体系中,模板DNA25ng,Buffer l×,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.2mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U。优化后的SRAP体系目标条带增多,重现性好。
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