单链抗体与力达霉素基因工程强化融合蛋白Fv-LDP-AE的抗肿瘤作用

被引:6
作者
高瑞娟
李亮
赵春燕
王玉凤
李电东
甄永苏
机构
[1] 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所
关键词
Ⅳ型胶原酶; 单链抗体; 力达霉素; 强化融合蛋白; 生物学活性; 抗肿瘤作用;
D O I
暂无
中图分类号
R73-3 [肿瘤学实验研究];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的研究抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(Fv)和力达霉素辅基蛋白(LDP)在大肠杆菌表达的融合蛋白(Fv-LDP)与力达霉素(LDM)的活性发色团AE形成的基因工程强化融合蛋白Fv-LDP-AE的生物学活性及体外抗肿瘤作用。方法采用酶联免疫吸附剂测定、免疫荧光细胞化学染色和明胶酶谱分析Fv-LDP-AE生物学活性;通过MTT法、Hoechst 33342和碘化丙啶共染、DNA ladder和侵袭实验探讨其抗肿瘤作用。结果 Fv-LDP-AE对人肝癌BEL-7402和人结肠癌HT-29细胞的免疫反应呈阳性,可与BEL-7402细胞特异结合,并呈剂量依赖性抑制人高转移性巨细胞肺癌PG细胞内Ⅳ型胶原酶分泌。Fv-LDP-AE对BEL-7402和PG细胞的增殖抑制作用比力达霉素强,可诱导BEL-7402细胞裂亡、凋亡,抑制BEL-7402细胞侵袭。结论 Fv-LDP-AE是一种以Ⅳ型胶原酶为靶点的、具有高效抗肿瘤活性的抗体药物。
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