彗星实验检测氧化介导的大鼠衰老神经细胞DNA损伤与修复

目的　观测过氧化氢诱导的大鼠衰老神经细胞 DNA损伤与修复情况。　方法　在荧光显微镜下观察不同浓度 H2 O2 处理的 3月、8月和 2 6月龄大鼠的脑皮质、海马和基底节经分离的神经细胞及氧化损伤断裂的单链 DNA,并做彗星图像分析。　结果　在相同浓度 H2 O2 介导下 ,衰老神经细胞 DNA损伤分值较正常神经细胞高 ,皮质细胞较海马、基底节区细胞 DNA损伤分值高 ,细胞更易受损伤。给予 0 .5～ 4 .0 h孵育后 ,表明脑细胞最大修复时间仅为 1 .0 h,且衰老神经细胞较正常神经细胞的 DNA损伤分值高 ,修复能力下降。当 H2 O2 介导浓度为 64μmol/L时 ,3月龄鼠脑皮质、海马和基底节神经细胞 DNA损伤分值依次为 2 50、2 1 3和 2 0 5,2 6月龄鼠 DNA损伤分值依次为 3 55、3 4 0和 3 3 5。当 H2 O2 介导浓度为 1 2 8μmol/L时 ,2 6月龄鼠 DNA修复率约为 1 0 %。　结论　彗星实验是一种非常敏感的检测 DNA损伤与修复的方法。