解偶联蛋白2过度表达对LO2肝细胞缺血再灌注损伤的影响

目的探讨解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)的过度表达对人LO2肝细胞系缺血再灌注损伤的影响及可能机制。方法构建UCP-2真核表达质粒,转染LO2肝细胞并筛选出阳性克隆进行鉴定。将转染重组质粒组和对照组肝细胞进行缺血再灌注处理后,采用原位Hoechest/PI染色,荧光显微镜观察细胞损伤情况,AnnexinⅤ/PI双标流式细胞仪检测细胞坏死率、凋亡率和存活率,并检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平。结果转染重组质粒组细胞在缺血再灌注后遭受的损伤显著重于对照组,转染重组质粒组细胞内ATP水平显著低于对照组,细胞坏死率、凋亡率、存活率与对照组细胞比较差异均有显著性意义(P<0.05)。结论肝细胞内UCP-2的过度表达加剧了缺血再灌注后细胞内ATP的耗竭,导致细胞遭受更为严重的损伤。