多重聚合酶链反应检测结核菌耐异烟肼相关基因

被引：16

作者：

程晓东

于文彬

苏明权

别良峰

段丽

郝晓柯

张建芳

机构：

[1] 第四军医大学西京医院检验科

[2] 陕西省结核病医院

来源：

第四军医大学学报 | 2003年 / 09期

关键词：

结核分枝杆菌; 多重聚合酶链反应; 药物耐受性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

摘要：

目的 :建立耐异烟肼 (isoniazid ,INH)结核分枝杆菌(M .tuberculosis,MTB)多重聚合酶链反应 (multiplePCR ,multi PCR)检测系统 ,在一次扩增中快速 ,特异地同时检出aphC启动子 ,inhA和kagG基因 ,用于快速初步诊断结核分枝杆菌对INH的耐药性 .方法 :根据结核分枝杆菌的aphC启动子 ,inhA和kagG序列 ,分别设计出 3对特异性寡聚核苷酸引物 ,采用multi PCR技术 ,同时检出对结核分枝杆菌耐INH起作用的 3个基因 .结果 :应用multi PCR反应体系 ,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果 ;multi PCR扩增的预期结果为 :单基因引物出现一条特异性扩增区带 ,多重基因引物出现 2或 3条特异性扩增区带 ,经实验达到预期的扩增结果 ;对H3 7Rv标准株、INH敏感株及INH耐药株分别采用常规PCR和multi PCR进行同时扩增 ,结果两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段 ,符合率达 10 0 % .结论 :multi PCR能有效地为多基因耐药的临床病原体的诊断提供快速、准确的诊断手段 ,更能提高检验效率

引用

页码：849 / 851

页数：3

共 4 条

[1]

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[2]

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[3]

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[4]

Zhang Y,Heym B,Allen B.The catalase-peroxidase gene and isoniazid resistance of Mycobacterium tuberculosis. Nature . 1992

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