瘤胃微生物总DNA提取方法的比较

被引：21

作者：

李旦 ^{[1
]}

杨舒黎 ^{[1
]}

罗淑萍 ^{[2
]}

王加启 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院畜牧研究所动物营养学国家重点实验室

[2] 新疆农业大学农学院

来源：

中国农学通报 | 2006年 / 09期

关键词：

瘤胃微生物; 总DNA; 提取方法;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.6 [家畜微生物学（兽医病原微生物学）];

学科分类号：

090507 [智慧养殖与动物生产学];

摘要：

目前如何获得完整的瘤胃微生物总DNA是对瘤胃微生物在分子水平研究中关键的一步。瘤胃微生物总DNA分子片段很大,大概在15kb￣20kb,因此需要选择一种合适的提取方法来获得完整的总DNA片段。笔者研究采用物理方法如玻璃珠研磨震荡法、反复冻融法、超声波破碎法、液氮研磨法等,化学方法如表面活性剂十二烷基磺酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)、溴化十六烷三甲基铵(CetyltrimethylAmmoniumBromide,CTAB等),酶解法(溶菌酶、蛋白酶K等)相结合,并对其进行比较,选择最佳的提取方法,使其符合以后PCR扩增要求以及其它后续研究工作。试验结果表明用玻璃珠研磨震荡加CTAB提取液的方法、反复冻融加SDS提取液的方法提取的瘤胃微生物总DNA的效果高于其它方法,并且通过电泳以及PCR检测,所提取的DNA的量适于进一步的分子生物学研究。

引用

页码：1 / 5

页数：5