蟑螂变应原Cr-PI包涵体的变复性研究

被引:4
作者
高波
刘志刚
苏东明
罗时文
机构
[1] 深圳大学生命科学学院,深圳大学生命科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳市微生物基因工程重点实验室,,深圳市微生物基因工程重点实验室,,
关键词
蟑螂; CrPI; 包涵体; 变复性; 质谱;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
本研究优化了GST CrPI融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达条件和GST CrPI包涵体的复性条件 ;采用GlutathioneSepharoseTM 4B亲和层析分离纯化融合蛋白 ,以Xa酶切去掉其GST标签后 ,对CrPI进行了电喷雾电离串联质谱分析 (ESI MS MS)。结果表明 ,IPTG浓度对该蛋白的诱导效果影响不大 ,OD6 0 0 值为 0 6时诱导效果最佳 ;复性蛋白浓度和L 精氨酸浓度对稀释复性结果有重要影响。纯化融合蛋白经Xa酶切、分子筛层析去掉GST标签后 ,重组蛋白的纯度达 95 % ,经质谱进一步鉴定为蟑螂CrPJ变应原
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