尖吻蝮蛇毒凝血样酶的纯化、性质及其萤光光谱

徐洵等用DEAE-Sephadex A-50将尖吻蝮蛇毒分离成十二个组份。经证明第十组份有凝血样酶活性。将此组份经Sehadex G-75、DE52柱进一步分离得到没有完全分开但都有凝血样酶活性的两个峰。用聚丙烯酰胺凝胶电泳检查,均为一条带。SDS凝胶电泳测分子量都在30,000左右,免疫扩散图谱显示二者不形成交叉沉淀线,说明这二个组份是很不专一的凝血样酶。最适pH为7.4,等电点接近4。 研究组份Ⅱ的自身萤光光谱,在中性缓冲液中与牛凝血酶自身萤光光谱比较,有所不同。表明这两个酶在构象上是有差异的。凝血样酶在pH2—9范围内与色氨酸比较,萤光光谱峰没有位移,活性变化伴随着萤光强度强弱变化。变温时凝血样酶萤光强度曲线与色氨酸变温曲线接近。凝血样酶活性不被肝素抑制,表现在其萤光强度基本不变。