基于Akt/NF-κB信号通路探讨牛蒡根水提物对盐酸/乙醇诱导的急性胃溃疡大鼠的保护作用

目的：基于蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路研究牛蒡根水提物(ALR-AE)对盐酸/乙醇(HCl/EtOH)诱导的大鼠急性胃溃疡的作用机制。方法：雄性大鼠随机分为5组，分别为正常组、模型组、雷尼替丁组(35 mg·kg-1)和ALR-AE低、高剂量组(50、100 mg·kg-1)，各给药组连续灌胃给药3 d，每天2次；末次给药30 min后，模型组及各给药组给予HCl/EtOH(以60%EtOH为溶剂，使HCl浓度为150 mmol·L-1)诱导大鼠急性胃溃疡。取各组胃组织样品，采用电子成像技术扫描溃疡面，ImageJ 1.8.0软件计算溃疡抑制率；分别采用苏木素-伊红(HE)和高碘酸-希夫(PAS)染色观察病理变化及糖蛋白的分布；比色法测定组织中氧化应激因子丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测组织样品中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β的水平；通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组组织中磷酸化(p)-Akt/Akt、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-NF-κB抑制蛋白α(IκBα)/IκBα、p-IκB激酶α(IKKα)/IKKα和蛋白水平。结果：与正常组比较，模型组胃组织损伤严重，胃溃疡面积显著增大(P<0.01);MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著升高(P<0.01),GSH-Px和SOD水平显著降低(P<0.01),Akt、NF-κB p65、IKKα和IκBα的磷酸化水平显著升高(P<0.01)；与模型组比较，ALR-AE可显著降低HCl/EtOH诱导的胃组织损伤程度、提高溃疡抑制率(P<0.01)，剂量依赖性地降低MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β的水平(P<0.05,P<0.01)，显著升高GSH-Px和SOD的水平(P<0.01),ALR-AE低剂量组可明显抑制Akt的磷酸化水平(P<0.05),ALR-AE高剂量组可明显抑制Akt、NF-κB p65、IKKα、IκBα的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论：ALR-AE对HCl/EtOH诱导的大鼠胃溃疡有显著的保护作用，其作用机制可能与抑制Akt/NF-κB信号通路介导的炎症介质表达及降低氧化应激水平有关。