β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及表达

被引：7

作者：

郭成栓

崔堂兵

郭勇

机构：

[1] 华南理工大学生物科学与工程学院

来源：

华南理工大学学报(自然科学版) | 2008年 / 36卷 / 12期

关键词：

葡聚糖内切酶; 大肠杆菌; 短小芽孢杆菌; 基因; 克隆; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌菌株H9中,克隆到了编码葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中进行表达,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测.实验结果表明:该基因大小为1980bp,共编码659个氨基酸,在大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;该酶的相对分子质量约为73000,由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成,其在不同温度和pH值下的活力和稳定性与原始菌株的比较接近.

引用

页码：112 / 115+145 +145

页数：5

共 7 条

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