硫代反义寡核苷酸在细胞培养内抗甲型流感病毒活性

为了研究抗流感病毒特异性反义核酸药物，针对Ａ型流感病毒基因组３′和５′端保守序列，设计并合成了４条硫代寡核苷酸（ＯＤＮ）：３′端反义ＯＤＮ（ＩＶ３＃）与３′端正义ＯＤＮ（ＩＶ３Ｓ），５′端反义ＯＤＮ（ＩＶ４＃）与５′端正义ＯＤＮ（ＩＶ４Ｓ）。以流感病毒血凝滴度和致细胞病变作用为指标，测定了ＯＤＮｓ在ＭＤＣＫ细胞中对Ａ型流感病毒Ａ／京防／８６－１（Ｈ１Ｎ１）复制的影响。结果表明，与流感病毒基因组５′端互补的ＯＤＮＩＶ４＃为１μｍｏｌ／Ｌ时，对病毒复制抑制率近５０％，为１０μｍｏｌ／Ｌ或更高时，抑制率超过７０％，ＩＶ４＃抑制病毒活性呈序列和剂量依赖性。为了提高ＩＶ４＃的细胞摄取效率，对其进行脂肪链修饰，并在ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染条件下考察了对病毒的抑制作用。结果发现，脂肪链修饰的ＩＶ４＃抑制病毒活性无明显增高；ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ能显著提高ＩＶ４＃及其脂肪链修饰物抑制病毒活性。反义寡核苷酸ＩＶ４＃为进一步研究人流感新型药物奠定了基础