在MDCK细胞上高产的乙型流行性感冒病毒株的筛选及其全基因组克隆

被引：9

作者：

齐立

吴昆昱

李梓

张烨

董婕

张立国

张智清

机构：

[1] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京　,北京　,北京　,北京　,北京　,北京　,北京

来源：

病毒学报 | 2004年 / 03期

关键词：

乙型流感病毒; 高产毒株; PFU; 通用引物; 全基因组克隆;

D O I：

10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001629

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

流行性感冒(流感)病毒可引起世界范围的大流行,因此需要及时地生产流感疫苗来预防流感的流行。乙型流感病毒是疫苗的重要组成部分。传统制备疫苗的方法是使用鸡胚生产,存在很多缺陷,应用哺乳动物细胞生产流感疫苗是个更好的选择。但是,乙型流感病毒感染MDCK细胞后,很难得到持续的高产。此实验筛选到的乙型流感病毒在MDCK细胞连续传代15代后,PFU值从第1代的8×104到第15代2×109,TCID50从第1代6 5到第15代的8 0。将筛选到的毒株进行全基因组克隆,用两套引物获得乙型流感病毒的全部8个节段。此结果为利用反向遗传技术将高产毒株与流行毒株重配,进而在哺乳动物细胞上生产基因工程流感疫苗打下基础。

引用

页码：195 / 199

页数：5

共 11 条

[1]

Structural changes in the haemagglutinin which accompany egg adaptation of an influenza A(H1N1)virus. Robertson J S,Bootman J S,Newman R,et al. Journal of Virology . 1987

[2]

Comparison of 10 influenza A(H1N1 and H3N2)haemagglutinin sequences obtained directly from clinical specimens to those of MDCK cell and egg grown viruses. Rocha E P,Xu X,Hall H E,et al. Journal of General Virology . 1993

[3]

Direct isolation in eggs of influenza A (H1N1)and B viruses with haemagglutinins of different antigenic and amino acid composition. Oxford J S,Newman R,Corcoran T,et al. Journal of General Virology . 1991

[4]

Production of influenza virus in serum- free mammalian cell cultures. Merten O W,Manuguerra J C,Hannoun C,et al. Developments in Biological Standardization . 1999

[5]

Growth and immunogenicity of influenza viruses cultivated in Vero or MDCK cells and in embryonated chicken eggs. Govorkova E A,Kodihalli S,Alymova I V,et al. Developments in Biological Standardization . 1999

[6]

African green monkey kidney(Vero)cells provide an alternative host cell system for influenza A and B viruses. Govorkova E A,Murti G,Meignier B,et al. Journal of Virology . 1996

[7]

Impairment of multicycle influenza virus growth in Vero(WHO) cells by loss of trypsin activity. Kaverin N V,Webster R G. Journal of Virology . 1995

[8]

Extensive heterogeneity in the hemagglutinin of egg- grown influenza viruses from different patients. Wang M L,Katz J M,Webster R G. Journal of Virology . 1989

[9]

Replication of influenza A viruses in a green monkey kidney continuous cell line(Vero). Govorkova E A,Kaverin N V,Gubareva L V,et al. The Journal of Infectious Diseases . 1995

[10]

A reverse genetics approach for recovery of recombinant influenza B viruses entirely from cDNA. Jackson D,Cadman A,Zurcher T,et al. Journal of Virology . 2002

← 1 2 →