逆转录—多聚酶链反应扩增黄病毒核酸的研究

黄病毒基因组为单链，正股ＲＮＡ，全长约１１Ｋｂ。在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，ＤＪＳ（＋）和ＤＪＡ（一）均为１７个硷基，扩增序列长度为４１３ｂＰ．应用逆转录一一多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）成功地扩增了登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符。采用该引物检测国内分离株ＤＥＮ１／（ＧＺ）、ＤＥＮ２（ＨＮ９１）和ＪＥＶ（Ａ２）株同样出现一条明显的扩增带（约４１３ｂＰ），说明该引物也适合于我国分离株。应用通用引物扩增黄病毒中的ＰＯＷ和ＬＧＴ均出现一条特异带。甲病毒属的辛德毕斯和基孔肯稚病毒应用该引物扩增后无特异性条带；扩增Ｃ６／３６细胞也无特异带。表明该通用引物特异性良好，对于今后黄病毒感染的临床快速诊断和进一步的分子病毒学研究均有重要意义。