变性高效液相色谱法同时检测5种食源性致病菌

[目的]建立变性高效液相色谱方法(DHPLC),同时检测5种食源性致病菌(包括沙门菌、副溶血弧菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希菌O157︰H7和单核细胞增生李斯特氏菌)。[方法]针对5种食源性致病菌特异毒力基因设计引物,进行多重PCR扩增,扩增产物用高效变性液相色谱仪检测。[结果]柱温50℃时,5种致病菌PCR扩增产物分别呈现特异DHPLC色谱图,并可充分分离。本方法检测灵敏度小于5cfu/ml,对目的分离株的正确检出率大于98%(82/83),38株非目的分离株检测均为阴性;对人工污染食品中的5种致病菌均可正确检测。[结论]该DHPLC方法具有较高的灵敏度和特异性,可同时检测5种食源性致病菌,适合于大批样品的快速筛检。