黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖的影响及作用机制研究

被引：10

作者：

王刘玉

万全会

陈军

机构：

[1] 南阳市第二人民医院

来源：

中医正骨 | 2023年 / 35卷 / 08期

关键词：

骨质疏松; 成骨细胞; 细胞增殖; 黄芪多糖; 信号传导;

D O I：

暂无

中图分类号：

R285 [中药药理学];

学科分类号：

100806 [中药药理学];

摘要：

目的:探讨黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞增殖的影响及作用机制。方法:将培养的第3代MC-3T3-E1成骨细胞分为黄芪多糖低、中、高浓度组及黄芪多糖联合抑制剂干预组、对照组，黄芪多糖低、中、高浓度组分别用含有0.1 mol·L-1、1.0 mol·L-1、10 mol·L-1黄芪多糖的DMEM培养基进行培养，黄芪多糖联合抑制剂干预组用含有10 mol·L-1黄芪多糖和10μmol·L-1 Compound C的DMEM培养基进行培养，对照组用DMEM培养基进行培养。干预24 h后，检测细胞增殖活力及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）、骨钙素（osteocalcin, OCN）、B淋巴细胞瘤-2（B-lymphoblastoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-related X protein, BAX）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cysteine aspartic acid specific protease, Caspase）-3、磷酸化腺苷一磷酸活化蛋白激酶（phosphorylated AMP-activated protein kinase, p-AMPK）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）等基因的蛋白表达情况。结果:（1）MC-3T3-E1成骨细胞增殖活力检测结果。黄芪多糖中、高浓度组细胞增殖活力均大于对照组（LSD-t=6.708,P=0.000;LSD-t=8.221,P=0.000）和黄芪多糖联合抑制剂干预组（LSD-t=2.314,P=0.049;LSD-t=5.286,P=0.001）,黄芪多糖高浓度组细胞增殖活力大于黄芪多糖低、中浓度组（LSD-t=5.579,P=0.001;LSD-t=4.423,P=0.010）。（2）MC-3T3-E1成骨细胞成骨标志基因蛋白表达检测结果。黄芪多糖低、中、高浓度组细胞ALP、OCN的蛋白表达量均高于对照组（ALP:LSD-t=3.528,P=0.008;LSD-t=4.417,P=0.002;LSD-t=6.822,P=0.000;OCN:LSD-t=3.153,P=0.014;LSD-t=6.485,P=0.000;LSD-t=6.543,P=0.000）和黄芪多糖联合抑制剂干预组（ALP:LSD-t=2.414,P=0.042;LSD-t=3.155,P=0.013;LSD-t=5.892,P=0.000;OCN:LSD-t=2.339,P=0.047;LSD-t=5.926,P=0.000;LSD-t=14.546,P=0.000）,黄芪多糖高浓度组细胞ALP、OCN的蛋白表达量高于黄芪多糖低、中浓度组（ALP:LSD-t=3.727,P=0.006;LSD-t=3.702,P=0.006;OCN:LSD-t=4.737,P=0.001;LSD-t=2.625,P=0.031）。（3）MC-3T3-E1成骨细胞线粒体凋亡途径相关基因蛋白表达检测结果。黄芪多糖中、高浓度组细胞Bcl-2的蛋白表达量均高于对照组（LSD-t=5.238,P=0.001;LSD-t=9.618,P=0.000）和黄芪多糖联合抑制剂干预组（LSD-t=3.821,P=0.006;LSD-t=8.246,P=0.000）,黄芪多糖高浓度组细胞Bcl-2的蛋白表达量高于黄芪多糖低、中浓度组（LSD-t=8.875,P=0.001;LSD-t=6.102,P=0.000）;黄芪多糖中、高浓度组细胞BAX、Caspase-3的蛋白表达量均低于对照组（BAX:LSD-t=5.285,P=0.001;LSD-t=7.340,P=0.000;Caspase-3:LSD-t=3.654,P=0.006;LSD-t=6.875,P=0.000）和黄芪多糖联合抑制剂干预组（BAX:LSD-t=3.654,P=0.006;LSD-t=6.875,P=0.000;Caspase-3:LSD-t=2.940,P=0.019;LSD-t=6.314,P=0.000）,黄芪多糖高浓度组细胞BAX、Caspase-3的蛋白表达量均低于黄芪多糖低、中浓度组（BAX:LSD-t=7.442,P=0.001;LSD-t=3.690,P=0.006;Caspase-3:LSD-t=4.496,P=0.002;LSD-t=4.642,P=0.002）。（4）MC-3T3-E1成骨细胞AMPK/eNOS信号通路相关基因蛋白表达检测结果。黄芪多糖低、中、高浓度组细胞p-AMPK、eNOS的蛋白表达量均高于对照组（p-AMPK:LSD-t=3.082,P=0.015;LSD-t=4.546,P=0.002;LSD-t=5.064,P=0.001;eNOS:LSD-t=3.395,P=0.009;LSD-t=5.873,P=0.000;LSD-t=7.327,P=0.000）和黄芪多糖联合抑制剂干预组（p-AMPK:LSD-t=5.819,P=0.000;LSD-t=6.731,P=0.000;LSD-t=6.961,P=0.000;eNOS:LSD-t=4.851,P=0.001;LSD-t=7.761,P=0.000;LSD-t=8.200,P=0.000）。黄芪多糖高浓度组细胞p-AMPK、eNOS的蛋白表达量高于黄芪多糖低浓度组（LSD-t=3.200,P=0.013;LSD-t=4.985,P=0.001）。结论:黄芪多糖能够促进MC-3T3-E1成骨细胞增殖，且该作用具有一定的浓度依赖性，其作用机制可能与调控线粒体凋亡途径及AMPK/eNOS信号通路有关。

引用

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共 23 条

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