开发实用的染色体加倍体系构建成烟草DH群体

通过对4种染色体加倍方法（烟草浸花药法、浸花培苗法,叶片再生法及浸腋芽法等）的比较研究表明:以4 g/L浓度的秋水仙碱浸泡花药法加倍率最高达47.5%75%,其次为叶片再生法（30%36.67%）和浸苗法（16.67% 32.35%）,而浸腋芽法较低（17.78%）。前两种方法加倍率虽高,但有较高畸形苗比率,叶片再生法工序较繁琐。作者认为烟草加倍单倍体产生,应以采用浸苗法为主。在使用秋水仙碱浸苗加倍时,添加DMSO可明显促进秋水仙碱的加倍效率,且促进作用随时间延长而提高;从高效、快捷和节约等原则考虑,我们开发了烟草有效的染色体加倍体系,以4g/L的秋水仙碱+20g/L DMSO溶液浸苗48h的效果最好。对两个组合烟草单倍体苗浸12h以上,其染色体加倍效率达到对照的2.30～2.93倍。本试验用较低浓度秋水仙碱添加DMSO有利于节约实验费用。通过完善染色体加倍技术程序已构建成2个DH群体,供基因定位研究。