重组人Midkine真核表达载体的构建以及蛋白表达和纯化

被引:1
作者
徐杨琪 [1 ]
李京敬 [2 ]
关文 [1 ]
郜尽 [2 ]
贾世香 [3 ]
屠平 [3 ]
韩伟 [2 ]
俞雁 [1 ]
机构
[1] 上海交通大学农业与生物学院
[2] 上海交通大学药学院
[3] 交晨生物医药技术(上海)有限公司
关键词
中期因子; 毕赤酵母; 发酵; 离子交换层析; 高效液相色谱;
D O I
10.13417/j.gab.033.000228
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
Midkine(MK)是一种肝素结合型生长因子,在胚胎早期的分化发育、肿瘤、炎症、再生等方面发挥着重要的调控作用。本研究将人MK(hMK)全长基因构建到pPICZa(B)表达载体上,通过化学转染方法,转染质粒至不同酵母菌株中进行筛选,利用毕赤酵母的高密度发酵进行表达,纯化出高纯度的重组人Midkine(rhMK),并通过试验证明,纯化的rhMK具有趋化UMR106细胞的活性。rhMK的真核表达与纯化方法的建立为后续的药效学试验奠定了基础,并对其它蛋白的真核表达、纯化也有一定的参考意义。
引用
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页数:6
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