TGF-β1对人腹膜间皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

【目的】观察TGF β1对人腹膜间皮细胞 (HPMCs)纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的mRNA和蛋白表达影响并就可能的机制进行探讨。【方法】取健康成年人大网膜进行原代培养 ,用 5ng/mlTGF β1刺激第三代培养细胞 ,采用免疫组织化学染色、Westernblot、ELISA以及RT PCR等方法 ,分别观察PAI 1的mRNA和蛋白表达 ,纤维连接蛋白 (FN)和Ⅰ型胶原 (COLⅠ )的mRNA和蛋白表达 ,细胞内磷酸化Smad2 / 3(p Smad2 / 3)的蛋白表达。【结果】刺激组PAI 1的mRNA和蛋白表达与对照组相比均显著增加 ,其中 2 4h为高峰 ,4 8h、72h依次递减 ;刺激组FN和COLⅠ的mRNA和蛋白表达与对照组比均呈时间依从性显著增加 ;对照组细胞内几乎不表达p Smad2 / 3,阳性细胞率 3% ,在刺激后 15min蛋白表达即开始增加 ,阳性细胞率2 9 % ,1h增加最明显 ,阳性细胞率达 84 % ,2h明显回落 ,此时阳性细胞率为 37%。【结论】TGF β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内PAI 1的转录与蛋白表达 ,这可能与TGF β1激活了HPMCs内Smad信号通路有关。