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重组质粒pPIC9K-oLHαhCGβCTP的构建及在毕赤酵母中的表达
被引：4
作者：
王桂玉
刘润梅
潘善培
李伟雄
机构：
[1] 国家计划生育委员会科学技术研究所分子生物室,暨南大学生殖免疫研究所
来源：
关键词：
人绒毛膜促性腺激素，部分重叠聚合酶链式反应，巴氏毕赤酵母，基因表达;
D O I：
10.13865/j.cnki.cjbmb.1999.02.001
中图分类号：
Q782 [基因载体];
学科分类号：
摘要：
将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐＰＩＣ９Ｋ质粒中，用电打孔方法转入巴氏毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ），并获高效表达．表达蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明分子量约为２８ｋＤ．２．５Ｌ发酵罐大量培养，产量可达２．０ｇ／Ｌ．
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