应用地高辛标记的cRNA探针原位杂交检测胰岛素mRNA

成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，用地高辛标记的ＣＲＮＡ探针在胰腺切片上进行原位杂交，以检测胰岛Ｂ细胞胰岛素基因表达产物ｍＲＮＡ，同时并用免疫组织化学法显示相邻切片胰岛素免疫反应阳性细胞，进行比较。胰腺经４％多聚甲醛灌注固定，经Ｂｏｕｉｎ液再固定２０ｈ，常规石蜡包埋和切片。经胰岛素ＣＲＮＡ探针杂交的胰腺切片中胰岛Ｂ细胞的胞质和核仁呈阳性反应，阳性信号为蓝色颗粒。瞩岛其他细胞及胰腺腺泡细胞为阴性。方法对照切片中均无阳性信号出现。经与免疫组织化学染色的相邻切片比较证明，原位杂交显示的阳性细胞与胰岛素免疫反应阳性细胞相一致。本研究所用原位杂交方法简单，结果可靠，重复性好。