高糖对牛视网膜微血管内皮细胞和周细胞线粒体活性氧的影响

目的探讨高糖条件下培养的牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化及导致此种变化的原因和所致影响。方法采用选择性培养方法培养牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞,通过共聚焦显微镜检测不同葡萄糖浓度下内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化,同时采用流式细胞仪检测线粒体膜电位、细胞死亡率的变化,RTPCR检测培养细胞锰超氧化物歧化酶及解藕联蛋白(UCP)1、2、3表达情况和不同葡萄糖浓度下的变化。结果(1)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞、周细胞线粒体活性氧的产生呈增多趋势。(2)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞线粒体膜电位逐渐升高,细胞死亡率逐渐增多,而周细胞则无此变化趋势。(3)培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞中,通过RTPCR检测到UCP1、2mRNA,未检测到UCP3。UCP1、2及锰超氧化物歧化酶表达量随培养基中葡萄糖浓度的变化而变化。结论高糖可以诱导培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生增多;内皮细胞活性氧产生的增多与线粒体膜电位增高间存在反馈调节;高糖条件下UCP1、2及锰超氧化物歧化酶表达量代偿性增多调节活性氧的产生,但是当糖浓度达到一定程度时,代偿机制消失;内皮细胞、周细胞在高糖条件下表现出的不同特征,说明其在糖尿病性视网膜病变的发生中起着不同的作用。