黄芪对糖尿病肾病大鼠肾间质Wnt/β-catenin及TGF-β1信号通路表达的影响

目的:观察黄芪(AM)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾间质中Wnt/β-catenin信号通路及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达情况的影响,探讨其抗糖尿病肾病肾间质纤维化的作用机制。方法:采用单次空腹腹腔注射60mg/kg链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型。4周后测定24h尿蛋白排泄量,以24h尿蛋白定量≥30mg确定DN大鼠模型成功(n=48)。48只DN大鼠随机分为4组:DN模型组(DN组)、黄芪治疗组(DA组)、DN模型组+氯沙坦治疗组(DL组)、DN模型组+黄芪联合氯沙坦治疗组(AL组),每组12只。选取12只健康雄性wistar大鼠作为正常对照组(N组)。连续给药12周后,记录大鼠体重,并检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)及24h尿蛋白定量;处死大鼠,留取肾组织行HE及Masson染色观察肾间质病理改变,采用免疫组织化学技术及实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测肾间质中Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白及mRNA的表达。结果:与N组比较,12周末DN组大鼠24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr水平明显增高,差异有统计学意义(P>0.05)。与N组比较,12周末DN组、DA组、DL组和AL组肾间质Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表达量明显增加(P<0.05)。DA组、DL组和AL组作两两比较,AL组24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr、Wnt4、β-catenin及TGF-β1下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。DA组与DL组相比各指标差异无统计学意义(P>0.05)。FQ-PCR结果显示wnt4、β-catenin和TGF-β1mRNA在各组大鼠肾组织中的表达与Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表达趋势一致。结论:黄芪可以降低24h尿蛋白定量,减轻肾间质病理损伤,下调wnt4、β-catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,提示黄芪可能通过下调Wnt4、β-catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,延缓DN大鼠肾间质纤维化的进程,而发挥肾脏保护作用。