从耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞系分离和鉴定肺癌干细胞的研究

目的从耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞系中分离侧群细胞(SP)以观察其是否富含肺癌干细胞(CSCs)样细胞,以期为肺癌CSCs样细胞生物学研究和干预建立基础。方法将A549/DDP细胞经过流式细胞术分选获得SP细胞并检测纯度,经过体外克隆形成试验检验其体外克隆形成能力。通过比较接种A549/DDP SP细胞和A549/DDP non-SP细胞的NOD/SCID鼠成瘤和肿瘤生长情况,观察其体内成瘤能力。结果流式细胞分析发现A549/DDP细胞中存在10%～17%的SP细胞。分离获得的SP细胞纯度>95%(平均97%)。SP细胞的体外克隆形成能力和non-SP细胞相比有统计学差异(克隆形成率的对数,即lgCFE:1.544±0.150vs.0.301±0.082,P<0.05)。接种A549/DDP SP细胞的NOD/SCID鼠的成瘤率较对照组存在明显差异。接种SP细胞的小鼠只需要5×103个SP细胞便足以成瘤,而接种non-SP细胞的小鼠却需要超过5×106个non-SP细胞才能在体内成瘤。A549/DDP SP成瘤能力是non-SP细胞成瘤能力的1000倍。结论耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞系中分离的SP细胞比例高且富含肺癌CSCs样细胞,可以用于肺癌CSCs样细胞生物学和干预治疗的研究。