蓖麻β-半乳糖苷酶的纯化及其基本性质

被引：4

作者：

孟延发

刘景会

李志孝

孟雪琴

陈耀祖

机构：

[1] 兰州大学应用有化学重点实验室,长春生物制品研究所,兰州大学应用有化学重点实验室,兰州大学应用有化学重点实验室,兰州大学应用有化学重点实验室兰州,兰州,兰州,兰州

来源：

生物化学杂志 | 1993年 / 02期

关键词：

蓖麻籽; β-半乳糖昔酶;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.1993.02.010

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

蓖麻籽黄化苗中存在高活性β-半乳糖苷酶。经硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素离子交換层析、Sephadex G-100、CM-Sephadex和DEAE-Sephadex层析纯化。活性收率为6.4％,纯化倍数达107倍。纯化了的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示两条蛋白带,其相应分子量分别为3.25×10～4和2.94×10～4。用Sephadex G-200分子筛层析法测得分子量为6.7×10～4。综合上述结果推测该酶是由两个不同的亚基构成。以邻硝基苯酚-β-半乳糖苷为底物测得该酶的表观Km为5.9×10-3mol/L。最适pH和最适温度分别为4.5和50℃。酸碱稳定区域在pH4.6—7.5之间。不同浓度缓冲液以及不同种类缓冲液、不同金属离子对酶活性影响均进行了讨论。

引用

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